產(chǎn)品展示
產(chǎn)品描述:
小鼠腎小球內皮細胞提取物【Mouse Kidney:Normal Glomerular Derivatives】
小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)小鼠腎小球內皮細胞提取物是從小鼠原代腎小球內皮細胞提取的,小鼠原代腎小球內皮細胞從正常小鼠腎小球組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
本公司供應的細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)的說明書或價格信息,點擊進入了解更多原代細胞提取物。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng) |
英文名稱 | Mouse Kidney:Normal Glomerular Derivatives |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
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技術傳授:
凍存培養(yǎng)基
小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)凍存細胞時必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含0% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細胞懸液離心5至0分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 °C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
細胞可重發(fā)跟不可重發(fā):
可以重發(fā)的情況有哪些?
()細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
()客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
以下是小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)的相關產(chǎn)品:
SCLY / Selenocysteine Lyase 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
NFASC / Neurofascin 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IHC-P 50 µg
IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
CD62L / L-Selectin 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
VSIG4 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
VSIG4 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
CD64 抗體, 鼠單抗 ELISA IHC-P FCM 50 µg
E-Cadherin / CDH / E-cad / CD324 抗體, 鼠單抗 FCM 50 µg
Complement Cs 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
小鼠腎小球內皮細胞提取物培養(yǎng)革蘭氏染色液試劑盒 4×0ml 盒
6-gingerol 6-姜酚 2353-4-6 20mg
Oleuropein 橄欖苦苷 3269-42-4 20mg
Vindoline 文多靈 282-4- 20mg
細胞爬片抗原修復液(×) 500ml 瓶
Naphthol Blue Black 氨基0B 5g 瓶
0-Hydroxycamptothecin 0- 9685-09-7 20mg
0.5ml/.5ml雙面離心管架 96孔 個
*0感受態(tài)細胞 0×00ul 袋
Erythritol 赤蘚糖醇 25g 瓶
次高分子量蛋白質Marker 0T 支
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