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大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Intestine PrimacellTM：Normal Colonic Smooth Muscle Cells】
     大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式。腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。 雖然結腸組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的結腸組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的結腸組織片能使得結腸組織中成結腸細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成結腸細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成結腸細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成結腸原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成結腸組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠結腸平滑肌細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠結腸平滑肌細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠結腸平滑肌細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠結腸平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠結腸平滑肌細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠結腸平滑肌細胞基礎培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）大鼠結腸平滑肌組織預備液（ x00 ml） （8）大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

斯氏普羅菲登斯菌 Providencia stuartii

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

NC膜(0.22um)30cm × 3m，5cm x 20cm

稻梨孢 Pyricularia oryzae

人間充質(zhì)干細胞-脂肪

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

漢遜德巴利酵母 Colletotrichum gloeosporioides

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

大鼠腦成纖維細胞*培養(yǎng)基00mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)6-氟-4-羥喹啉分子式：63.5英文名稱：6- -4- hydroxy group：39-78-6分子量： C9H6FNO

4-脲唑分子式：77.6英文名稱：4- phenyl urea：5988--分子量： C8H7N3O2

丙分子式：668.39英文名稱：Propidium iodide：25535-6-4分子量： C27H34I2N4

2,4-二氯-6,7-二甲氧喹唑啉分子式：259.09英文名稱：2,4- two, -6,7- two, a：2763-29-4分子量： C0H8Cl2N2O2

,3,5-三[(4-三氟甲磺酰氧)-3-(*硅)]分子式：967.2英文名稱：,3,5- three [(4- three) -3- (three methyl silicone) phenyl] benzene：847925-63-7分子量： C36H39F9O9S3Si3

羅丹明23英文名稱：Luo Danming 23分子式：380.82分子量： C2H7ClN2O3：62669-70-9

4-羥乙乙磺英文名稱：4- HEPES分子式：238.3分子量： C8H8N2O4S：7365-45-9

雙甲酮英文名稱：Double ketone分子式：40.8分子量： C8H2O2：26-8-8

4-溴異喹啉分子式：208.05英文名稱：4- bromide：532-97-4分子量： C9H6BrN

辛醛英文名稱：Xin Xiquan分子式：26.2分子量： C8H4O：2548-87-0

注意事項：
. 接收到大鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。