細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；HBMEC；人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

種屬來源；人

組織來源；腦

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷是腦血管疾病發(fā)生的使動環(huán)節(jié)，血管內(nèi)皮細(xì)胞通過釋放和合成多種血管活性因子，在血管自穩(wěn)態(tài)的過程中發(fā)揮重要作用。

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白 Recombinant Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

IFNA2重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白

PDGFRB重組人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 蛋白 Protein

GPA33重組小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 蛋白 Protein

Annexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體 0.5mgAnnexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體

KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

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小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 人酶2(CA-2)檢測試劑盒

HumanoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2檢測試劑盒人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物中性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(neualinvease)活性比色法定量檢測試劑盒(胞質(zhì))20次

Humaenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R(TN-R)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

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豚鼠卵清蛋白特異性IgG檢測試劑盒   豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒、豚鼠卵清蛋白特異性IgGeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豚鼠卵清蛋白特異性IgE檢測試劑盒   豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒、豚鼠卵清蛋白特異性IgEeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽檢測試劑盒   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒、豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠速受體1(TACR1)檢測試劑盒 ，英文名： TACR1 ELISA Kit

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CLIAKitforHIS(HumanHistamine)ELISAKIT人組胺

細(xì)胞ROS激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

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